產(chǎn)品僅用于科研注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。 產(chǎn)品名稱(chēng):悉尼馬爾太蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格 英文名稱(chēng):Marteilia sydneyiPCR 編號(hào):HE31200-R 類(lèi)別:PCR檢測(cè)試劑盒 儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。 運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門(mén)。
? 儲(chǔ)需要自備的器材: 1.儀器:分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。 特點(diǎn): 1.即開(kāi)即用,用戶(hù)只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡(jiǎn)單,定量準(zhǔn)確快速。 2. 引物經(jīng)過(guò)優(yōu)化,特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長(zhǎng)度為 560 bp。 3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 4. 提供陽(yáng)性對(duì)照,便于分析試驗(yàn)結(jié)果。 保存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。 3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 甘草次酸(α型)英文名稱(chēng) Secoisolariciresinol Diglucoside分 子 量: 542.57CAS NO.: 148244-82-0純 度: ≥98%分子式: C32H46O16性狀: 淡黃色粉末規(guī)格: 20mg/50mg/1g,可按客戶(hù)需求包裝!用途: 用于科研研究、鑒定、藥理實(shí)驗(yàn)等熔點(diǎn):溶解性: 可溶于甲醇、乙醇、DMSO等有機(jī)溶劑;提取來(lái)源: 亞麻籽Linumusitatissmum藥理藥效: 亞麻木酚素具有預(yù)防與防治癌、前列腺癌、結(jié)腸癌的作用鑒別方法: NMR;Ms檢測(cè)方法: RP-HPLC:乙腈:水:乙酸=17:83:0.5 λ:280nm(僅供參考)貯存條件: 低溫冷藏,避光,密封,干燥注意事項(xiàng): 甘草次酸(β型)英文名稱(chēng) Coumarin 6分 子 量: 350.43412CAS NO.: 38215-36-0純 度: ≥98%分子式: C20H18N2O2S性狀: 補(bǔ)充中規(guī)格: 20mg/50mg/1g,可按客戶(hù)需求包裝!用途: 用于科研研究、鑒定、藥理實(shí)驗(yàn)等熔點(diǎn): 補(bǔ)充中溶解性: 補(bǔ)充中提取來(lái)源: 補(bǔ)充中藥理藥效: 補(bǔ)充中鑒別方法: NMR;Ms檢測(cè)方法: 補(bǔ)充中貯存條件: 低溫冷藏,避光,密封,干燥注意事項(xiàng): 補(bǔ)充中 甘草次酸十八酯英文名稱(chēng) Linolenic acid ethyl ester分 子 量: 306.48CAS NO.: 1191-41-9純 度: ≥98%分子式: C20H34O2性狀:規(guī)格: 20mg/50mg/1g,可按客戶(hù)需求包裝!用途: 用于科研研究、鑒定、藥理實(shí)驗(yàn)等熔點(diǎn):溶解性: 可溶于甲醇、乙醇、DMSO等有機(jī)溶劑;提取來(lái)源: 竹葉,紫蘇子藥理藥效: 亞麻酸乙酯具有治療高脂血癥的作用鑒別方法: NMR;Ms檢測(cè)方法: HPLC貯存條件: 低溫冷藏,避光,密封,干燥注意事項(xiàng): 甘草苷英文名稱(chēng) Scularin分 子 量: 462.37CAS NO.: 27740-01-8純 度: ≥98%分子式: C21H18O12性狀: 淡黃色結(jié)晶粉末規(guī)格: 20mg/50mg/1g,可按客戶(hù)需求包裝!用途: 用于科研研究、鑒定、藥理實(shí)驗(yàn)等熔點(diǎn): 205-206 °C溶解性: 可溶于甲醇、乙醇、DMSO等有機(jī)溶劑;提取來(lái)源: 半枝蓮、燈盞細(xì)辛,黃芩(SculariaaltissimaL.)的葉藥理藥效: 野黃芩苷具有降低腦血管阻力,改善腦血循環(huán)、增加腦血流量的作用鑒別方法: NMR;Ms檢測(cè)方法: RP-HPLC:甲醇:水:醋酸(35:61:4) λ:335nm(僅供參考)貯存條件: 低溫冷藏,避光,密封,干燥注意事項(xiàng): 無(wú) 甘草苷元-7-O-D-芹糖-4'-O-D-葡萄糖苷英文名稱(chēng) Procyanidin B1分 子 量: 578.52CAS NO.: 20315-25-7純 度: ≥98%分子式: C30H26O12性狀: 淡黃色粉末規(guī)格: 20mg/50mg/1g,可按客戶(hù)需求包裝!用途: 用于科研研究、鑒定、藥理實(shí)驗(yàn)等熔點(diǎn):溶解性: 可溶于甲醇、乙醇、DMSO等有機(jī)溶劑;提取來(lái)源: 葡萄籽藥理藥效: 原花青素B1具有抗氧化,抗腫瘤,保護(hù)心血管的作用鑒別方法: NMR;Ms檢測(cè)方法: HPLC貯存條件: 低溫冷藏,避光,密封,干燥注意事項(xiàng): 甘草素英文名稱(chēng) Naringenin chalcone分 子 量: 272.25CAS NO.: 73692-50-9純 度: ≥98%分子式: C15H12O5性狀:規(guī)格: 20mg/50mg/1g,可按客戶(hù)需求包裝!用途: 用于科研研究、鑒定、藥理實(shí)驗(yàn)等熔點(diǎn):溶解性: 可溶于甲醇、乙醇、DMSO等有機(jī)溶劑;提取來(lái)源:藥理藥效:鑒別方法: NMR;Ms檢測(cè)方法: HPLC貯存條件: 低溫冷藏,避光,密封,干燥注意事項(xiàng): 甘草酸英文名稱(chēng) Protopanaxdiol分 子 量: 460.738CAS NO.: 30636-90-9純 度: ≥98%分子式: C30H52O3性狀: 白色結(jié)晶粉末規(guī)格: 20mg/50mg/1g,可按客戶(hù)需求包裝!用途: 用于科研研究、鑒定、藥理實(shí)驗(yàn)等熔點(diǎn):溶解性: 可溶于甲醇、乙醇、DMSO等有機(jī)溶劑;提取來(lái)源: 人參藥理藥效: 原人參二醇具有抗腫瘤,抗癌的作用鑒別方法: NMR;Ms檢測(cè)方法: RP-HPLC:甲醇:水(90:10 ) λ:203nm(僅供參考)貯存條件: 低溫冷藏,避光,密封,干燥注意事項(xiàng): 甘草酸單銨鹽英文名稱(chēng) Senkyunolide I分 子 量: 224.25CAS NO.: 94596-28-8純 度: ≥98%分子式: C12H16O4性狀: 微黃色油狀物規(guī)格: 20mg/50mg/1g,可按客戶(hù)需求包裝!用途: 用于科研研究、鑒定、藥理實(shí)驗(yàn)等熔點(diǎn):溶解性: 可溶于甲醇、乙醇、DMSO等有機(jī)溶劑;提取來(lái)源: 川芎根莖藥理藥效: 洋川芎內(nèi)酯I具有腦保護(hù)作用鑒別方法: NMR;Ms檢測(cè)方法: HPLC貯存條件: 低溫冷藏,避光,密封,干燥注意事項(xiàng): 甘草酸二銨英文名稱(chēng) Senkyunolide H分 子 量: 224.25CAS NO.: 94596-27-7純 度: ≥98%分子式: C12H16O4性狀: 微黃色油狀物規(guī)格: 20mg/50mg/1g,可按客戶(hù)需求包裝!用途: 用于科研研究、鑒定、藥理實(shí)驗(yàn)等熔點(diǎn):溶解性: 可溶于甲醇、乙醇、DMSO等有機(jī)溶劑;提取來(lái)源: 川芎根莖藥理藥效: 洋川芎內(nèi)酯H具有腦保護(hù)作用鑒別方法: NMR;Ms檢測(cè)方法: HPLC:甲醇-0.5乙酸溶液梯度洗脫,λ:280nm(僅供參考)貯存條件: 低溫冷藏,避光,密封,干燥注意事項(xiàng): 悉尼馬爾太蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格 Ampicillin (sodium) 氨芐青霉素鈉別名: Pentrexyl sodium salt;Principen sodium salt;D-(-)-α-Aminobenzylpenicillin sodium saltCAS: 69-52-3CAS: 2478-38-8分子式: C10H12O4 MTT 噻唑藍(lán)別名: Thiazolyl Blue;Thiazolyl Blue Tetrazolium Bromide;Methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromideCAS: 298-93-1英文名稱(chēng): CisplatinCAS: 15663-27-1 Carbenicillin (disodium)別名: Geocillin disodium;Sodium carbenicillinCAS: 4800-94-6英文名稱(chēng): p-NPP (p-Nitrophenyl phosphate, disodium, hexahydrate)CAS: 4264-83-9 Hygromycin B 潮霉素B別名: HygrovetineCAS: 31282-04-9CAS: 620-45-1分子式: C12H6Cl2NNaO2·xH2O IPTG 異丙基-β-D-硫代半乳糖苷別名: Isopropyl β-D-thiogalactosideCAS: 367-93-1英文名稱(chēng): PMS (Phenazine methosulfate)CAS: 299-11-6 ATP (disodium salt) 三磷酸腺苷二鈉別名: Disodium adenosine triphosphate;Adenosine 5'-triphosphate disodium saltCAS: 987-65-5英文名稱(chēng): Ninhydrin hydrateCAS: 485-47-2 PMSF 苯甲基黃酰氟別名: Phenylmethylsulfonyl fluoride;Benzylsulfonyl fluorideCAS: 329-98-6英文名稱(chēng): AnthroneCAS: 90-44-8 Amphotericin B 可溶性?xún)尚悦顾谺別名: Fungizone;Fungilin;AmBisomeCAS: 1397-89-3 反應(yīng)五要素: 參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則: ①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。 ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。 技術(shù)原理: DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。 在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過(guò)溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性) 產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。 |